Q Cromatograffeg Pilenni Anion Cryf

 

2. manteision cynnyrch

2.1 Mae - cyflym ac effeithlon yn cyflawni gallu rhwymo uchel ar gyfraddau llif hyd at 40 gwaith yn gyflymach na resinau traddodiadol. O'i gymharu â chromatograffeg gwely llawn, mae'r amser proses gan ddefnyddio cromatograffaeth pilen yn cael ei leihau 30-40 gwaith. Y gyfradd llif gweithredu nodweddiadol yw 10 MV/munud.

2.2 Mae cromatograffaeth bilen - effeithlonrwydd rhwymo uchel yn arddangos gallu llwytho uchel a chyfraddau llif uchel o dan amodau gollwng pwysedd isel, gan ganiatáu i fiomoleciwlau wedi'u gwefru gael eu dal mewn un pasyn.

2.3 - graddadwy a hyblyg gall y gyfres lawn o gynhyrchion cromatograffaeth pilen fodloni anghenion amrywiol puro biomacromolecwl, gan gwmpasu pob cam o ddatblygu prosesau i gynhyrchu ar raddfa fawr. Mae'r dyluniad strwythurol math capsiwl yn cefnogi gweithrediad un defnydd ac ailddefnyddio ar ôl glanhau.

2.4 Gwella cynhyrchiant - Mae'r cynllun cryno yn lleihau ôl troed cyfleuster. Trwy ddileu pacio colofnau, glanhau, dilysu glanhau, a gweithrediadau storio colofnau, mae'r broses yn gofyn am lai o glustogi ar gyfer cydbwysedd a gellir ei berfformio'n uniongyrchol heb baratoi colofn. Gellir lleihau costau llafur hyd at 50%.

 

3. Paramedr technegol

3.1 Deunydd strwythurol

	Graddfa labordy	raddfa fach	graddfa peilot	graddfa cynhyrchu
cyfaint bilen	0.2ml	5ml	140ml	5L
Strwythur cefnogi bilen:	polypropylen (PP)
tai bilen	polypropylen (PP)
O ffoniwch	silicôn

 

3.2 Nodweddion gweithredu

	Graddfa labordy		graddfa peilot	graddfa cynhyrchu
cyfaint bilen	0.2ml	5ml	400ml	5L
Cyfradd llif a argymhellir	1-6ml/munud	25-150ml/munud	2-12L/munud	25-150L/munud
Uchafswm tymheredd gweithredu	35 gradd
Y pwysau gweithredu uchaf	3 bar (25 gradd)
Gwahaniaeth pwysau uchaf	3 bar (25 gradd)
Amodau storio:	20% ethanol hydoddiant dyfrllyd

 

Mae bywyd gwasanaeth cromatograffaeth bilen Q yn debyg i fywyd cromatograffaeth gel agarose.

 

 

Ffigur 1. Newidiadau yng nghapasiti llwytho cromatograffaeth pilen ar ôl defnydd lluosog a fonitrwyd gan BSA

Yn ogystal, gwnaethom werthuso effeithlonrwydd tynnu cromatograffaeth pilen ar gyfer proteinau celloedd lletyol ac asidau niwclëig. Mae'r canlyniadau fel a ganlyn.

	DNA				HCP
	Adferiad IgG	Cynnwys (pg/mg o IgG) gan RT PCR		Ffactor Tynnu	Cynnwys(ng/mg o IgG)gan Elisa		Ffactor Tynnu
Rhedeg	%	Cyn Q Pilen	Ar ôl Q bilen	Log	Cyn Q Pilen	Ar ôl Q bilen	Log
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Tabl 1. Cyfraddau tynnu DNA a phroteinau celloedd lletyol mewn CHO-deunydd IgG mynegedig gan ddefnyddio cromatograffaeth pilen Q

 

Dangosodd cyfres o arbrofion y gall cromatograffaeth bilen Q gael gwared ar amhureddau yn effeithiol wrth gynnal adferiad IgG targed uchel.

Yn ogystal, gwnaethom gymharu cromatograffaeth bilen Gudiling â brandiau a fewnforiwyd, ac mae'r data capasiti llwytho fel a ganlyn:

Capasiti llwytho (mg/ml)	Sartorius	PALL	Guidling
ASS	29	60	45
SOD	25	40	35
Protein A	27	45	40
Trypsin	30	56	44

Tabl 2. Perfformiad llwytho gwahanol broteinau ar ein cynnyrch a chynhyrchion cystadleuwyr

Mae gwerthusiad cyffredinol yn dangos bod ein gallu llwytho yn debyg i gynhyrchion a fewnforir,

Ffigur 2.Gan ddefnyddio modiwl cromatograffaeth bilen Q, defnyddiwyd BSA fel y protein safonol i werthuso'r gallu rhwymo. Cymharwyd y gallu rhwymo deinamig â chynhwysedd cynhyrchion a fewnforiwyd. Dangosodd y canlyniadau y gallai'r rhan fwyaf o'r protein targed gael ei ddal a'i ddiystyru150 mM NaClwrth ddefnyddio BSA fel y protein model.

Trwy wahanol amodau elution, canfuom fod ymddygiad elution cromatograffaeth pilen yn debyg i ymddygiad cromatograffaeth gel agarose. Mae purdeb proteinau sy'n cael eu hanwybyddu mewn gwahanol grynodiadau halen yn amrywio'n sylweddol. Mewn datblygu a chynhyrchu prosesau gwirioneddol, mae angen pennu'r amodau elution gorau posibl yn feintiol er mwyn cael y protein targed â phurdeb uchel.

 

4. Achos Cais Nodweddiadol

Tynnu DNA, firysau, proteinau celloedd lletyol (HCP), ac endotocsinau

Dal plasmidau, firysau a phroteinau, yn ogystal â phuro oligonucleotidau

 

5. Gweithdrefn Weithredu

5.1: Paratoi a Chynulliad Offer:

5.1.1:System cromatograffaeth AKTA: Gosodwch y modiwl cromatograffaeth bilen mewn modd tebyg i golofnau wedi'u pacio. Sicrhewch fod y cyfeiriad saeth ar y modiwl yn gyson â'r cyfeiriad llif porthiant. Cysylltwch y system gan ddefnyddio cysylltwyr Luer neu ffitiadau Tri-Clamp.

5.1.2 Gosodwch gyfradd llif y fewnfa i 5–10 MV/munud a defnyddiwch y byffer ecwilibreiddio i dynnu aer o'r system. Ar ôl sicrhau nad oes unrhyw swigod aer yn y ffrwd allfa, cysylltwch yr allfa treiddio i'r system cromatograffaeth.

5.2:Triniaeth cyn-defnyddio:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV i sicrhau bod y bilen yn cyrraedd ecwilibriwm.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV i sicrhau bod y bilen yn cyrraedd ecwilibriwm.

5.3 Proses Cromatograffaeth

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV nes bod y bilen yn cyrraedd ecwilibriwm.

5.3.2 Ar ôl i'r sampl gael ei -hidlo ymlaen llaw trwy hidlydd 0.22 μm, llwythwch ef ar y golofn nes bod y sampl gyfan wedi'i gosod neu nes cyrraedd y capasiti rhwymo cromatograffaeth.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV nes bod y signal UV yn disgyn i'r llinell sylfaen.

5.3.4 Perfformio graddiant neu elution llinol yn unol â'r protocol a ddyluniwyd, a chasglu ffracsiynau yn ôl yr angen.

5.4 Post CIP-defnyddio Triniaeth – Dyfais Cromatograffaeth Pilenni CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV nes bod y signal UV yn disgyn o dan y llinell sylfaen.

5.4.2 Ar ôl cylchredeg am 30 munud, newidiwch i olchi dŵr nes bod y pH yn cyrraedd 7–8, yna newidiwch i ethanol 20% a pharhau i olchi nes bod y dargludedd yn sefydlogi.

5.5, Storio Cromatograffaeth Pilenni:

Ar ôl defnyddio a chwblhau CIP, gellir dadosod y modiwl bilen a'i storio mewn ethanol 20%, neu ei gadw ar-lein ar dymheredd ystafell mewn ethanol 20%. Dylai'r hydoddiant ethanol gael ei ddisodli a'i archwilio o bryd i'w gilydd.

 

6. Gwybodaeth Archebu

Q Strong Anion-Hidlen Capsiwl Cromatograffeg Pilenni Cyfnewid

	Graddfa labordy	raddfa fach	graddfa peilot	graddfa cynhyrchu
Model Cynnyrch	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
cyfaint bilen	0.2ml	5ml	400ml	5L

Tagiau poblogaidd: q cromatograffaeth bilen anion cryf, Tsieina, cyflenwyr, gweithgynhyrchwyr, ffatri, cyfanwerthu, swmp, mewn stoc, sampl am ddim