Ion Gwan CM-Cyfnewid Cromatograffaeth Pilenni

SP Cyfnewid Cation Cryf Membrane Cromatograffaeth Cynnyrch Cyflwyniad 

 

2. Manteision Cynnyrch

Cyflym ac Effeithlon Gellir cyflawni capasiti rhwymo uchel ar gyfraddau llif hyd at 40 gwaith yn gyflymach na chromatograffaeth resin traddodiadol. O'i gymharu â chromatograffeg sy'n seiliedig ar resin confensiynol, gellir lleihau'r amser prosesu gan ddefnyddio cromatograffaeth bilen 30-40 gwaith. Y gyfradd llif gweithredu nodweddiadol yw tua 10 MV/munud.

2.2 Effeithlonrwydd Rhwymo Uchel Mae cromatograffaeth bilen yn arddangos cynhwysedd rhwymol uchel a chyfraddau llif uchel ar ostyngiad pwysedd isel, gan alluogi i fiomoleciwlau wedi'u gwefru gael eu dal mewn un llwybr trwy'r modiwl.

2.3 Graddadwy a Hyblyg Gall yr ystod lawn o gynhyrchion cromatograffaeth pilen ddiwallu anghenion amrywiol puro biomoleciwl, gan gwmpasu cymwysiadau o ddatblygu prosesau i gynhyrchu ar raddfa fawr. Mae cynllun y capsiwl yn caniatáu gweithrediad untro neu gellir ei lanhau a'i ailddefnyddio ar ôl gweithdrefnau glanhau priodol.

2.4 Cynhyrchiant Gwell Mae'r cynllun cryno yn lleihau ôl troed cyfleuster. Trwy ddileu gweithrediadau megis pacio colofnau, glanhau, dilysu glanhau, a storio colofnau, gellir dechrau prosesu ar ôl cydbwyso syml gyda llai o glustogi. Gan nad oes angen pacio, glanhau neu storio colofnau, gellir lleihau costau llafur mwy na 50%.

 

 

3 Paramedr Technegol

3.1 Deunyddiau Strwythurol

	Graddfa labordy	raddfa fach	graddfa peilot	graddfa cynhyrchu
cyfaint bilen	0.2ml	5ml	140ml	5L
Strwythur Cefnogi Pilenni	Polypropylen
tai bilen	Polypropylen
O ffoniwch	Silicôn

3.2 Nodweddion Gweithredu

	Graddfa labordy	raddfa fach	graddfa peilot	graddfa cynhyrchu
cyfaint bilen	0.2ml	5ml	400ml	5L
Cyfradd llif a argymhellir	1-6ml/munud	25-150ml/munud	2-12L/munud	25-150L/munud
Uchafswm tymheredd gweithredu	35 gradd
Y pwysau gweithredu uchaf	3 bar (25 gradd)
Gwahaniaeth pwysau uchaf	3 bar (25 gradd)
Amodau storio	20% ethanolaciwsolution

Mae cymhariaeth yn dangos bod bywyd gwasanaeth cromatograffaeth pilen SP yn debyg i fywyd SP Sepharose 6FF.

Ffigur 1. Cynhwysedd Rhwymo Newidiadau Cromatograffaeth Pilenni SP Ar ôl Profi Aml Ddefnydd gyda Lysosym

Yn ogystal, gwnaethom werthuso cromatograffaeth y bilen am ei effeithlonrwydd wrth gael gwared ar broteinau celloedd lletyol ac asidau niwclëig. Mae'r canlyniadau fel a ganlyn:

	DNA				HCP
	Adferiad IgG	Cynnwys (pg/mg o IgG) gan RT PCR		Ffactor Tynnu	Cynnwys(ng/mg o IgG)gan Elisa		Ffactor Tynnu
Rhedeg	%	Cyn Q Pilen	Ar ôl Q bilen	Log	Cyn Q Pilen	Ar ôl Q bilen	Log
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Tabl 1. Cyfraddau Tynnu Protein DNA a Celloedd Lletyol mewn CHO-Deunydd IgG Mynegedig Gan Ddefnyddio Cromatograffaeth Pilenni SP

Dangosodd cyfres o arbrofion y gall cromatograffaeth pilen SP gael gwared ar halogion yn effeithiol wrth gynnal cyfradd adennill uchel o'r IgG targed.

Wrth gymharu cromatograffaeth bilen Gudiling SP â brandiau wedi'u mewnforio, mae'r data capasiti rhwymo fel a ganlyn:

Rhwymocawchusrwydd (mg/mL)	Sartorius	PALL	Guidling
Lysosym	25	32	29
Trypsin	22	27	25

Tabl 2. Perfformiad Gallu Rhwymo Gwahanol Broteinau yn Ein Cynnyrch a Brandiau Cystadlu

Mae gwerthusiad cyffredinol yn dangos bod ein gallu rhwymo yn debyg i allu cynhyrchion a fewnforir.

Ffigur 2. Prawf Cynhwysedd Rhwymo Modiwl Cromatograffeg Pilenni SP Gan Ddefnyddio Lysosym fel Safonol

O'i gymharu â chynhwysedd rhwymo deinamig a chynhyrchion wedi'u mewnforio, cadarnhawyd y gellir dal y rhan fwyaf o broteinau targed pan fydd lysosym yn cael ei ddiystyru mewn 190 mM NaCl.

Trwy wahanol amodau elution, canfuom fod proffiliau elution cromatograffaeth pilen yn debyg i rai gel agarose, ond mae purdeb proteinau yn amrywio'n sylweddol ar wahanol grynodiadau halen. Mewn ymchwil a datblygu a chynhyrchu go iawn, mae angen pennu'n feintiol yr amodau elution optimaidd i gael proteinau targed purdeb uchel.

 

4 Achos Cymhwysiad Nodweddiadol

Cael gwared ar DNA, firysau, a phroteinau celloedd lletyol

Dal plasmidau, firysau, proteinau, a phuro oligonucleotidau

Tynnu pigmentau o broth eplesu burum a dal-cynhwysedd uchel o brotein

 

5 Gweithdrefn Defnydd

5.1 Paratoi a Chynulliad Offer:

5.1.1:Gosod y modiwl cromatograffaeth bilen ar system cromatograffaeth ÄKTA gan ddilyn gweithdrefnau tebyg i golofnau resin, gan sicrhau bod cyfeiriad y llif yn cyd-fynd â saethau'r modiwl a chyfeiriadedd y fewnfa. Cysylltwch y modiwl gan ddefnyddio cloeon Luer neu ffitiadau arddull clamp i'w hintegreiddio'n ddiogel i'r system.

5.1.2 Gosod y gyfradd llif porthiant i5–10 MV/munuda degas y modiwl gan ddefnyddio byffer equilibration, gan sicrhau bod yr elifiant yn rhydd o swigod aer. Unwaith y bydd wedi'i ddadnwyo, cysylltwch allfa'r treiddiad i'r system cromatograffaeth.

5.2: Cyn-Defnyddio Triniaeth:

5.2.1:

Gosodwch y gyfradd llif porthiant i5–10 MV/munuda pherfformio cyn-driniaeth gyda0.5 M NaOH am fwy na 5 MV, gan sicrhau bod y bilen yn cyrraedd ecwilibriwm llawn.

5.2.2: Ar yr un gyfradd llif, perfformio cyn-driniaeth gyda1 M NaCl am fwy na 5 MVi sicrhau bod y bilen yn cyrraedd ecwilibriwm llawn.

5.3 Proses Cromatograffaeth

5.3.1 Gosodwch gyfradd llif y porthiant i 5–10 MV/munud ac ecwilibrwch y bilen â byffer ecwilibreiddio am fwy na 5 MV, nes bod y bilen yn cyrraedd ecwilibriwm llawn.

5.3.2 Ar ôl 0.22 μm cyn hidlo, llwythwch y sampl ar y bilen nes bod llwytho'r sampl wedi'i gwblhau neu hyd nes y cyrhaeddir y capasiti rhwymo cromatograffig.

5.3.3 Golchwch gyda byffer equilibration am fwy na 10 MV nes bod y signal UV yn dychwelyd i'r llinell sylfaen.

5.3.4 Cymhwyso elution graddiant neu esgyniad fesul cam yn unol â chynllun y broses, a chasglu ffracsiynau yn ôl yr angen.

5.4 Post CIP-Defnyddio Triniaeth – Dyfais Cromatograffaeth Pilenni CIP (Glanhau yn ei Le)

5.4.1 Gosodwch y gyfradd llif porthiant i 5–10 MV/munud a pherfformio glanhau gyda 1 M NaOH am fwy na 10 MV, nes bod y signal UV yn gostwng i fod yn is na'r llinell sylfaen.

5.4.2 Ar ôl cylchredeg am 30 munud, newidiwch i olchi dŵr nes bod y pH yn cyrraedd 7–8, yna parhewch i lanhau gyda 20% ethanol nes bod y dargludedd bron yn gyson.

5.5 Storio Cromatograffaeth Pilenni

Ar ôl defnyddio a chwblhau CIP, gellir tynnu'r modiwl bilen a'i storio trwy socian mewn 20% ethanol, neu gellir ei storio mewn -llinell ar dymheredd ystafell mewn hydoddiant sy'n cynnwys 20% ethanol. Dylid archwilio'r datrysiad ethanol 20% a'i ddisodli o bryd i'w gilydd.

 

6. Gwybodaeth archebu

Q Hidlo Capsiwl Pilen Cromatograffeg Cyfnewid Anion Cryf

	Graddfa labordy	raddfa fach	graddfa peilot	graddfa cynhyrchu
Model Cynnyrch	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Cyfrol bilen	0.2ml	5ml	400ml	5L

Tagiau poblogaidd: ïon wan cm-cyfnewid cromatograffaeth bilen, Tsieina, cyflenwyr, gweithgynhyrchwyr, ffatri, cyfanwerthu, swmp, mewn stoc, sampl am ddim