Effaith Pilenni Ultrafiltration Gyda Meintiau Mandwll Gwahanol Ar Dileu Endotoxin

Yn ôl ein hystadegau, yn y rhan fwyaf o achosion, gall y detholiad o gasetiau bilen ag agorfa bilen o 10kd neu is ryng-gipio'r rhan fwyaf o endotocsinau yn effeithiol, lleihau cynnwys endotoxin i lefel isel iawn, a diwallu anghenion y rhan fwyaf o gymwysiadau diwydiant meddygol a fferyllol. Roedd lefel lleihau cynnwys endotoxin yn wahanol gyda maint mandwll gwahanol. O ystyried yr agwedd hon, rydym wedi gwneud rhywfaint o ymchwil, mae'r cynnwys fel a ganlyn:

 

Beth yw endotoxin

Mae endotoxin, a elwir hefyd yn lipopolysaccharide, lipid A, ffynhonnell wres, yn strwythur unigryw ar wal allanol wal gell bacteria Gram-negyddol (GNB), ac mae'n gymhleth o bwysau moleciwlaidd cymharol uchel. Oherwydd heterogeneity cemegol endotoxin, gall màs moleciwlaidd cymharol endotoxin o wahanol ffynonellau amrywio o filoedd i ddegau o filoedd, ac oherwydd amffiphilicity endotoxin, gall ffurfio cysylltiad mewn dŵr, a màs moleciwlaidd cymharol ei gysylltiad yn gallu cyrraedd 400,000 i 1,000,{5}}.

 

Pam ddylai gael gwared ar endotocsinau

1. Rôl endotoxin

Mae endotoxin yn cael effaith thermogenic sylweddol ar famaliaid. Mae'r bacteria yn dod yn wenwynig pan fyddant yn marw neu'n glynu wrth gelloedd eraill. Gall ychydig bach o endotocsin (pwysau corff 2 ng/kg) a chwistrellir yn fewnwythiennol achosi twymyn, a gall dosau mawr achosi aflonyddwch cylchrediad y gwaed a sioc endotocsin. Yn ôl darpariaethau'r pharmacopoeia cenedlaethol, dylai cynnwys endotoxin mewn cyffur neu baratoad fod yn is na'r terfyn rhagnodedig. Er enghraifft, ar gyfer albwmin gwaed dynol, dylai terfyn cynnwys endotoxin bacteriol fod yn llai na 2 EU/mL yn unol â'r Weithdrefn Prawf ar gyfer Endotocsin Bacteraidd mewn Cynhyrchion Biolegol. Dylai'r terfyn ar gyfer endotocsinau bacteriol mewn interfferonau fod yn llai na 10 EU/mL.

 

2. Halogi endotoxin

Mae gan endotocsin effeithiau biolegol amlwg in vivo ac in vitro. Mewn systemau celloedd rhydd, gall endotocsinau mewn crynodiadau nanogram effeithio ar ymddygiad mathau penodol o gelloedd a hyd yn oed moleciwlau, gan effeithio ar weithgareddau ffisiolegol arferol.

Felly, endotoxin yw ffynhonnell llygredd y rhan fwyaf o ddeunyddiau biolegol, ac mae ei fodolaeth yn gwneud i lawer o brofion biolegol a chyffuriau ymddangos yn ganlyniadau anhrefnus, sy'n dod â llawer o anawsterau i gynhyrchu.

(1) Halogi cyffuriau. Er enghraifft, gall amrywiaeth eang o feddyginiaethau gorllewinol wedi'u syntheseiddio gan ddulliau cemegol a meddyginiaethau Tsieineaidd traddodiadol a dynnwyd o blanhigion gael eu halogi gan endotocsinau yn ystod eu synthesis neu echdynnu.

(2) Deunyddiau crai ar gyfer cynhyrchu. Gall cynhyrchion gwaed amrywiol a chyfryngau celloedd hefyd gael eu halogi fwy neu lai yn ystod y broses baratoi.

(3) Asiantau biolegol. Er enghraifft, interferon, interleukin neu broteinau therapiwtig amrywiol neu peptidau a weithgynhyrchir gan dechnoleg DNA ailgyfunol, y defnydd o E. coli fel cludwr mynegiant yn y broses weithgynhyrchu, neu ffactorau allanol amrywiol, mae'n anodd osgoi halogiad endotoxin.

 

Y syniad o gael gwared ar endotocsin trwy uwch-hidlo

Oherwydd màs moleciwlaidd cymharol fawr endotocsinau, gellir defnyddio pilenni ultrafiltration i dynnu endotocsinau o ddŵr. Mae dewis maint mandwll a deunydd y bilen ultrafiltration yn dibynnu ar bwysau moleciwlaidd cymharol, nodweddion a chynnwys pyrogen y cyffur sy'n cael ei drin. Er mwyn cadw'r rhan fwyaf o pyrogen, mae angen defnyddio pilen ultrafiltration gyda màs moleciwlaidd cymharol o 5000 neu 10000, ac ar yr adeg honno mae'r pwysau yn ystod y llawdriniaeth yn uwch, ac nid yw'n addas ar gyfer rhai paratoadau fferyllol sy'n cynnwys màs moleciwlaidd cymharol fawr. cydrannau. Oherwydd bydd tynnu pyrogen yn cadw neu'n amsugno'r cynhwysion effeithiol yn yr hylif, ac effeithir yn fawr ar gynnyrch y cynnyrch.

Gan fod moleciwlau endotoxin yn cael eu cyhuddo'n negyddol o dan amodau niwtral, gall dewis deunyddiau â gwefr bositif fel polysulfone, polyacrylonitrile, polyamid a philenni hidlo microfandyllog eraill wella effaith tynnu moleciwlau endotoxin. Yn ogystal, mae hefyd yn ddull i staenio daear diatomaceous ar y ffilm cellwlos, ac yna arsugniad polyelectrolyte positif arno ar gyfer tynnu endotoxin. Fodd bynnag, effeithiodd pH yn fawr ar effaith tynnu'r pilenni micromandyllog gwefredig hyn ar endotoxin. Mae gan hidlydd dwfn Guidling Technology ddaear diatomaceous, y gellir ei ddewis yn rhydd a ddylid ychwanegu tâl cadarnhaol yn ôl proses y defnyddiwr. Yn y broses o gael gwared ar amhureddau megis celloedd, malurion celloedd a phroteinau amrywiol, gall ei strwythur mandyllog naturiol mewnol gynyddu'r llwyth pilen o hidlo.

 

Effaith tynnu endotoxin pilenni ultrafiltration gyda meintiau mandwll gwahanol

 

Yma rydym yn trafod effaith tynnu pilenni ultrafiltration o sawl ffynhonnell wahanol o achosion tynnu endotoxin:

1. Tynnu endotoxin bacteriol yn chwistrelliad Shengmai trwy ddull ultrafiltration

1.1 Rhagymadrodd

Mae Chwistrelliad Pwls yn fath o doddiant dyfrllyd wedi'i sterileiddio a wneir o pwls SAN trwy ddiwygio ffurf dos. Mae'n cynnwys ginseng coch, ophiopogon a schisandra schisandrae. Mae ganddo effeithiau buddiol o fywiogi pwls qi, cryfhau a sefydlogi dadhydradiad, sefydlogi pwysedd gwaed, cynyddu grym cyfangiad myocardaidd, ac mae ganddo effaith glinigol dda wrth drin afiechydon system gardiofasgwlaidd a endocrin.

 

1.2 Cydrannau Bilen

Pilen uwch-hidlo tywys (rhyng-gipio màs moleciwlaidd cymharol 10,30,100 kDa)

 

1.3 Dulliau arbrofol

1.3.1 Paratoi canolradd hylif sy'n cynhyrchu pwls

Cyfeiriwch at y broses o baratoi pigiad Zhongsheng Mai yn y Safon Cyffuriau Genedlaethol (WS3-B-2865-98-2011) a'i adolygu (ZGB2011-48). Gan bwyso 100 go ginseng coch, 312 go ophiopogon a 156 go schisandra chinensis, echdynnwyd ginseng coch trwy ddull adlif ethanol, a echdynnwyd ophiopogon chinensis a schisandra chinensis trwy ddull distyllu stêm, a chafwyd 1L o hylif pwls canolraddol (cafodd pulseproduced hylif medicinal). roedd pob 10 ml yn cyfateb i 1 go ginseng coch, 3 go ophiopogon a 1.5 go schisandra chinensis).

 

1.3.2 Ultrafiltration

Cymerwyd rhywfaint o ganolradd hylif gwneud pwls, addaswyd y pH i 7.5, a'i roi yn y system ultrafiltration wedi'i drin â dŵr. Ar ôl rhyng-gipio'r pwysau moleciwlaidd cymharol 10,30,100 kDa o bilen ultrafiltration polyether yn ultrafilted, a chydbwyswyd y cylch ultrafiltration am 60 munud. Ar ôl cwblhau'r ultrafiltration, cyfrifwyd y cyfraddau adennill (R) o ginsenoside Rg1, Re, Rb1 a schisandrin A. Mesurwyd cynnwys endotoxin bacteriol cyn ac ar ôl ultrafiltration yn feintiol trwy ddull cymylogrwydd deinamig, a chyfrifwyd cyfradd tynnu endotoxin bacteriol yn yr hylif (Q).

R{0}}Hidlydd /A cyntefig ×100%

Q= (Hidlydd C -C) /C ×100%

Yn y fformiwla, A yw arwynebedd brig pob cydran weithredol yn yr ultrafiltrate, A yw arwynebedd brig pob cydran weithredol yn yr hydoddiant cyffuriau gwreiddiol, C yw cynnwys endotoxin bacteriol yn yr ultrafiltrate, a C yw cynnwys bacteriol endotoxin yn y toddiant cyffuriau gwreiddiol.

 

1.4 Pennu athreiddedd cynhwysion actif

After ultrafiltration of two kinds of ultrafiltration membranes (with the relative molecular weight of 10, 30, 100kDa retained), the permeability of each active component is shown in Table 1. The results showed that with the increase of membrane pore size, the permeability of effective components increased correspondingly. When the pore size of the membrane reaches 100 kDa, the permeability of the effective components is equal to >. 90%, a gall pob un o'r tri chynhwysyn gweithredol basio trwy bilen ultrafiltration 100 kDa. Cymharwyd arwynebedd brig pob cydran weithredol yn yr hydoddiant uwch-hidlo pilen 100 kDa cyn ac ar ôl cromatogram gan HPLC, gan nodi nad oedd bron unrhyw golled o 4 cydran.

 

1.5 Astudiaeth ar effaith tynnu endotocsin bacteriol

Dangosir newidiadau cynnwys endotoxin bacteriol mewn canolradd hylif sy'n cynhyrchu pwls cyn ac ar ôl ultrafiltration gan bilen ultrafiltration yn Nhabl 2. Dangosodd y canlyniadau fod cynnwys endotoxin yn yr hylif gwreiddiol wedi gostwng yn sylweddol ar ôl ultrafiltration gyda phwysau moleciwlaidd cymharol gwahanol. Ar ôl 100 kDa uwch-hidlo pilen uwch-hidlo, roedd cynnwys endotocsin yn yr hylif yn llawer is na'r gwerth terfyn o 5.0EU·mL-1 mewn chwistrelliad Shengmai clinigol.

1.6 Trafodaeth

Yn y papur hwn, yn seiliedig ar effaith pilen ultrafiltration a wnaed o PSO, canfuwyd nad oedd gan ginsenoside Rg1, Re, Rb1 a schisandra A bron unrhyw golled pan ddefnyddiwyd pilen ultrafiltration â rhyng-gipio pwysau moleciwlaidd cymharol o 100 kDa, a endotocsinau bacteriol yn gellid tynnu'r hylif yn effeithiol, gan fodloni'r gofynion terfyn clinigol. O'i gymharu â charbon wedi'i actifadu ar gyfer tynnu pyrogen, gall technoleg ultrafiltration nid yn unig ddileu problemau arsugniad cystadleuol a dirlawnder arsugniad, ond hefyd warantu diogelwch y pigiad i raddau helaeth, a darparu sylfaen arbrofol ar gyfer y broses o baratoi pigiad Shengmai.

 

2. Dylanwad pilen ultrafiltration rhyng-gipio gyda phwysau moleciwlaidd o 10kd ar y broses tynnu pyrogen o saline arferol

 

2.1 Cyflwyniad

Wrth baratoi cynhyrchion biolegol heb pyrogen, gwelir yn aml bod endotoxin alldarddol yn achosi pyrogen uchel, a gellir datrys offer trwy bobi sych a socian sodiwm hydrocsid, ond nid yw paratoi'r datrysiad ar raddfa fawr yn addas ar gyfer y driniaeth uchod, ac ystyrir ei fod yn defnyddio pecynnu ffilm llif tangential ar gyfer datrysiad ar raddfa fawr i gael cynnwys endotoxin cymwys.

 

2.2 Dileu endotocsin

2.2.1 Triniaeth uwch-hidlo samplau

Mae endotoxin bacteriol yn llawer llai na bacteria, gyda diamedr A o tua 1-50nm, mae lipid A yn llai, maint bach a phwysau ysgafn, ac mae gan endotocsin bacteriol ymwrthedd gwres da. Yn gyffredinol, defnyddir pecyn bilen ultrafiltration llif tangential 10kd i ryng-gipio endotoxin a chymryd y llif tangential trwy'r datrysiad.

2.2.3 Canlyniadau arbrofol

Defnyddiodd Guidling Technology gasét bilen 10kd o ddeunydd PES i gynnal arbrawf microhidlo ar yr hylif porthiant, ac mae'r canlyniadau fel a ganlyn:

Dangosodd y canlyniadau y gallai'r casét bilen ultrafiltration gyda'r pwysau moleciwlaidd rhyng-gipio o 10kd a gynhyrchwyd gan dechnoleg Guidling gael gwared ar endotoxin yn effeithiol ac ehangu'r cynhyrchiad ymhellach.

 

Am Guidling

Mae Guidling Technology yn fenter uwch-dechnoleg genedlaethol sy'n canolbwyntio ar fiofferyllol, diwylliant celloedd, puro a chrynodiad biofeddygaeth, diagnosis a hylifau diwydiannol. Rydym wedi llwyddo i ddatblygu dyfeisiau hidlo allgyrchol, casetiau ultrafiltration a microfiltration, hidlydd firws, system TFF, hidlydd dyfnder, ffibr gwag, ac ati Sy'n cwrdd yn llawn â senarios cais biofferyllol, diwylliant celloedd, ac ati. Defnyddir ein hidlwyr pilenni a philenni yn eang mewn crynodiad, echdynnu a gwahanu cyn-hidlo, microhidlo, ultrafiltration a nanofiltradiad. Mae ein llawer o linellau cynnyrch, o hidlo labordy bach, untro i systemau hidlo cynhyrchu, profi sterility, eplesu, diwylliant celloedd a mwy, yn diwallu anghenion profi a chynhyrchu. Mae Guidling Technology yn edrych ymlaen at gydweithio â chi!