Crynodeb:

Mae'r erthygl hon yn adolygu dau ffactor allweddol y mae'n rhaid eu hystyried mewn strategaethau puro protein: gofynion cais i lawr yr afon a nodweddion biolegol y proteinau eu hunain. Mae'r erthygl yn pwysleisio mai puro protein o ansawdd uchel yw'r sylfaen ar gyfer dibynadwyedd ac ailadroddadwyedd data arbrofol, yn enwedig ar gyfer cynhyrchu proteinau ailgyfunol. Mae gan wahanol senarios cymhwysiad ofynion penodol ar gyfer purdeb proteinau, gweithgaredd neu gynnwys endotoxin, a gall nodweddion proteinau effeithio'n sylweddol ar y strategaethau puro. Yn ôl achosion penodol, mae'r erthygl yn dangos y dylai proteinau unigryw fabwysiadu cynlluniau puro wedi'u haddasu. Yn olaf, cynigiwyd proses cynhyrchu protein systematig (Ffigur 1), gan bwysleisio rheolaeth ansawdd y broses lawn o ddewis systemau mynegiant, dyluniad adeiladu i optimeiddio puro, ac argymell gwerthuso homogenedd ac ymarferoldeb protein trwy dechnegau bioffisegol (megis SEC-MALS, DSF, ac ati). Nod yr erthygl hon yw darparu arweiniad ymarferol i ymchwilwyr, gan eu helpu i lunio strategaethau puro effeithlon ac ailadroddadwy yn seiliedig ar nodweddion a gofynion cymhwysiad proteinau targed, a thrwy hynny wella ansawdd ac effeithlonrwydd ymchwil wyddonol.

 

Ffigur 1. Diagram sgematig o broses cynhyrchu protein

 

Cynhyrchu protein uchel eu galw - enghreifftiau o adnabod problemau, dylunio strategaeth lliniaru ac allbwn cyfatebol

 

1. Asid Niwcleig yn rhwymo i brotein:

Wrth buro proteinau rhwymo asid niwclëig, mae angen camau lluosog i gael gwared ar halogiad asid niwclëig. Yn ystod lysis, mae angen ychwanegu'r niwclysau (fel nuclease SM (benzonase®) neu DNase neu rNase), ond ni ellir tynnu'r asidau niwclëig wedi'u rhwymo yn llwyr. Ailosod camau tynnu asid niwclëig, fel PEI neu wlybaniaeth sylffad streptomycin, puro heparin neu gromatograffeg cyfnewid ïon. Cafodd presenoldeb asidau niwcleig ei fonitro gan gymhareb A26 0 nm\/a28 0 nm trwy gydol y broses buro. Os oedd y gymhareb yn is na 0.6, nododd fod purdeb y protein yn gymharol uchel a bod yr halogiad asid niwclëig yn fach iawn. Ar gyfer proteinau ag asidau niwclëig wedi'u rhwymo'n gryf, gellir eu dadnatureiddio dros dro (megis eu trin ag wrea) ac yna eu hail -bwyso. Pwyntiau Allweddol: Defnyddiwch adweithyddion o ansawdd uchel, byfferau ffres a cholofnau glân (yn lân gyda 0.5m NaOH cyn eu defnyddio).

 

2. Cadwyn Trwm Ferritin Llygoden:

Pwrpas cynhyrchu protein cadwyn trwm ferritin llygoden puredig (MFTH1) yw microsgopeg cryo-electron un gronyn cydraniad uchel (cryo-EM). Amharwyd yn uwch yn uwchddi fector mynegiant Escherichia coli a amgodiwyd heb ei labelu heb ychwanegu unrhyw gnewyllyn. Ar ôl gwresogi ar radd 7 0, roedd yn cael ei dyodiad amoniwm sylffad, dialysis a chamau cromatograffeg gwahardd maint. Roedd y sampl a ddeilliodd o hyn yn dangos presenoldeb llawer iawn o halogion mewn delweddau microsgopeg cryo-electron (Ffigur 2A), a oedd yn gwbl anaddas ar gyfer ei gymhwyso. Optimeiddio'r camau. Ychwanegwch nuclease SM yn ystod y broses lysis celloedd a'r broses dialysis ar ôl dyodiad sylffad amoniwm, ac yna ychwanegwch y cam cromatograffeg cyfnewid anion i leihau cymhareb A26 0 nm\/a280nm o 1.4 i 0.8. Cromatograffeg gwahardd ar ôl maint, cymhareb A260NM\/A280NM o'r sampl MFTH1 terfynol oedd 0.56. Dangosodd y delweddau microsgopeg SDS-PAGE a Cryo-Electron (Ffigur 2B) fod y protein yn bur iawn, gan nodi bod yr halogion wedi'u tynnu'n effeithiol.

Ffigur 2 cadwyn trwm ferritin llygoden

 

 

 

3. Protein simnai DSRBEC Dynol (DSRBD-EGF- chiMERA):

Mae Dsrbec yn cael ei ffurfio trwy ymasiad y parth rhwymo RNA â haen ddwbl (DSRBD) o brotein dynol kinase R a ffactor twf epidermaidd dynol (HEGF). Pan fynegir DSRBD yn Escherichia coli, mae'n dangos gallu rhwymo dsRNA uchel iawn. Ar ôl lysis celloedd, bydd yr RNA contaminent yn rhwystro rhwymo proteinau ailgyfunol i'r golofn cromatograffeg affinedd ïon metel sefydlog (IMAC). Ni all dulliau confensiynol fel PEI neu dyodiad sylffad streptomycin, triniaeth RNase neu doddiannau clustogi halen uchel gael gwared ar RNA. Perfformiwyd lysis celloedd gan ddefnyddio byffer sy'n cynnwys wrea 4M. Llwythwyd yr uwchnatur ar golofn IMAC, a defnyddiwyd 4M i 0 m wrea yn araf dros nos (ail -aladu colofn). Ychwanegwyd y byffer renaturation gydag imidazole a'i echdynnu o'r golofn IMAC. Gwnaed y mireinio terfynol trwy hidlo gel Superdex 75 i gael DSRBEC gweithredol weithredol.

 

4. Proteinau sy'n rhwym i gations divalent neu gofactorau eraill:

Ar gyfer proteinau sy'n rhyngweithio â cations divalent fel Zn 2+, Fe 2+, cu 2+, neu gofactorau eraill, mae'n hanfodol ychwanegu cations divalent penodol (neu gofodyddion eraill) yn ystod mynegiant. Mae angen ychydig bach o'r un cations divalent (neu gofactorau eraill) hefyd yn ystod y broses buro. Fodd bynnag, rhaid osgoi defnyddio unrhyw asiantau chelating (fel EDTA, EGTA) ac asiantau lleihau chelating (fel DTT neu DTE). Wrth ddelio â phroteinau sy'n rhwym i gations divalent, rhaid defnyddio cymysgedd o atalyddion proteas heb asiantau chelating i gadarnhau presenoldeb gwirioneddol cations divalent (neu gofactorau eraill) yn y protein wedi'i buro trwy ddulliau sbectrosgopig (megis sbectroffotometreg amsugno atomig)).

 

5. Ferridoxin ailgyfunol (RFD) sy'n cynnwys clwstwr sengl [2FE ± 2S] o cyanobacteria thermoffilig mastigocladus laminosus

Mae ferridoxin yn brotein haearn hydawdd sy'n cymryd rhan mewn adweithiau trosglwyddo electronau. Mae ferroredoxin math planhigion yn cario un clwstwr [2FE ± 2S] fel derbynnydd electron o system ffotos I. Mynegodd y straen Escherichia coli BL21 (DE3) y protein RFD ailgyfunol yn y cyfrwng TB sy'n cynnwys fECL3 10mm a gwrthfiotigau. Perfformiwyd elution y golofn dal IMAC gan ddefnyddio byffer sy'n cynnwys histidine 10mm i osgoi imidazole ac atal dinistrio'r clwstwr [2FE ± 2S]. Defnyddiwyd cromatograffeg cyfnewid anion a gwahardd maint ar gyfer puro a chanolbwyntio ymhellach i 12mg\/mL ar gyfer sgrinio crisialu. O'i gymharu â chynhyrchiad ailgyfunol ferroredoxin, cyflawnodd y ferroredoxin naturiol wedi'i buro o'r algâu gwyrddlas mastigocladus laminosus gydraniad uwch yn ystod crisialu.

 

6. Proteinau a ddefnyddir fel antigenau

Defnyddir proteinau yn aml fel antigenau i adfer ligandau targed-benodol. Y peth cyntaf i'w ystyried yw a yw'r protein yn cael ei ddefnyddio ar gyfer imiwnedd in vivo i gael IgG monoclonaidd neu polyclonaidd confensiynol, neu ar gyfer rhaglenni sy'n cynnwys IgG Camel neu brosesau dethol in vitro.

 

6.1 Antigenau a ddefnyddir ar gyfer cynhyrchu gwrthgyrff arferol

Pan ddefnyddir antigenau i gynhyrchu gwrthgyrff IgG monoclonaidd, fel rheol nid oes angen plygu cywir yr antigen, oherwydd mae'r rhan fwyaf o wrthgyrff monoclonaidd yn cydnabod epitopau llinol nad ydynt yn cael eu heffeithio'n fawr gan strwythur yr antigen, ac mae antigenau annaturiol hyd yn oed (fel proteinau corff cynhwysiant)) yn aros yn effeithiol. Fodd bynnag, rhaid rheoli'r purdeb yn llym er mwyn osgoi halogion imiwnogenig cryf sy'n ymyrryd â'r ymateb imiwnedd ac achosi goruchafiaeth gwrthgyrff nad ydynt yn darged.

 

6.2 Sgrinio'r Llyfrgell Gyfarch

Dylid rhoi sylw arbennig i gynnal cydffurfiad naturiol yr antigen wrth brosesu'r Llyfrgell Nanobody a gafwyd trwy imiwneiddio camel. Yn wahanol i wrthgyrff confensiynol, mae gwrthgyrff Camel (yn enwedig nanobodïau) yn tueddu i gydnabod epitopau strwythurol, sy'n gysylltiedig â'u strwythur safle cyflenwol amgrwm unigryw. Yn yr un modd, wrth sgrinio llyfrgelloedd gwrthgyrff synthetig neu naturiol mawr in vitro, rhaid i'r antigen gynnal strwythur sy'n hollol gyson â'r cymhwysiad targed. Gan nad yw'r broses sgrinio ei hun yn rhagfarnllyd, os yw'r antigen yn camddatblygu, agregu neu heterogenedd cydffurfiol, gellir sgrinio nifer fawr o gyfamodau sy'n targedu epitopau annaturiol.

 

 

 

7. Proteinau sy'n cynnwys bondiau disulfide rhyngfoleciwlaidd neu intramoleciwlaidd neu cystein am ddim

Mae bondiau disulfide yn hanfodol ar gyfer sefydlogi strwythur naturiol proteinau. Yn ystod y broses buro, wrth buro proteinau sy'n cynnwys bondiau disulfide rhyngfoleciwlaidd neu intramoleciwlaidd, mae angen osgoi ychwanegu asiantau lleihau i atal newidiadau cydffurfiol y proteinau, a thrwy hynny newid eu swyddogaethau. Ar gyfer proteinau sy'n cynnwys cystein am ddim, mae asiantau lleihau yn anhepgor ym mhob cam o'r broses buro, yn enwedig yn ystod y storfa, er mwyn atal ffurfio bondiau disulfide artiffisial. Yr asiantau lleihau a ddefnyddir amlaf yw dithiothreitol (DTT), -mercaptoethanol (-me), a Tris (2- Carboxyethyl) hydroclorid ffosffin (TCEP). Ar gyfer resinau iMac sy'n anghydnaws â DTT neu TCEP, argymhellir defnyddio -me a rhoi asiantau lleihau eraill yn eu lle mewn camau dilynol.

 

8. Darn gwrthgorff ailgyfunol

Er bod strwythur darnau gwrthgyrff ailgyfunol (fel nanobodïau) yn symlach na strwythur IgG, mae eu swyddogaeth yn dibynnu ar ffurfio bondiau disulfide yn gywir. Mewn systemau mynegiant bacteriol, hyd yn oed wrth fabwysiadu strategaethau optimeiddio, gall cynhyrchion wedi'u heiddio neu wedi'u plygu'n rhannol ddigwydd o hyd, sy'n bodoli yn y rhan hydawdd ac yn y corff cynhwysiant. Mwy o gudd yw y gall darnau gwrthgorff wedi'u plygu'n gywir hyd yn oed ffurfio agregau hydawdd (agregu colloid) trwy blaciau hydroffobig ar yr wyneb. Mae'n anodd nodi agregau o'r fath mewn profion swyddogaethol arferol (megis ELISA) oherwydd gall rhwymo aml-lenyddol guddio'r dirywiad mewn affinedd monomer, ond gall eu presenoldeb effeithio'n ddifrifol ar gymwysiadau sy'n dibynnu ar faint moleciwl bach (fel microsgopeg uwch-ddatrysiad). Felly, mae dibynnu'n llwyr ar SDS-PAGE yn ddigonol i werthuso ansawdd y sampl. Rhaid mabwysiadu dulliau bioffisegol fel hidlo gel (Ffigur 3) i wahaniaethu monomerau (prif gopaon) oddi wrth agregau (copaon cyfaint gwahardd). Ymhlith y pwyntiau rheoli allweddol mae: optimeiddio'r amgylchedd rhydocs yn ystod mynegiant i hyrwyddo ffurfio bondiau disulfide, ac optimeiddio amodau storio ar ôl puro i atal agregu. Mae'r mesurau hyn yn hanfodol ar gyfer sicrhau monodispersity a swyddogaeth y darnau gwrthgyrff.

Ffigur 3. Gwahanu hidlo gel o agregau hydawdd o nanobodïau

 

9. Darnau hydawdd o dderbynnydd lymffocyt LLT1

Mae mynegiant ailgyfunol o broteinau disulfide sy'n ddibynnol ar fond (fel derbynnydd lymffocyt LLT1) yn aml yn wynebu anawsterau plygu. Roedd hidlo gel o LLT1 o fath gwyllt yn dangos copaon agregu a chopaon pylu (Ffigur 4a), ond datgelodd sbectrometreg màs gamddatblygu a achoswyd gan cystein heb bâr yn y pylu (Ffigur 4b). At y diben hwn, dyluniwyd dau fwtant: fe wnaeth un ddileu'r broblem cystein, gan arwain at ostyngiad sydyn yn y cynnyrch (Ffigur 4A); Ar ôl cyflwyno neocysteine ​​i ailadeiladu'r bond disulfide cydymffurfiedig, roedd gan y mutant nid yn unig gynnyrch uchel a sefydlogrwydd da, ond gallai hefyd grisialu (Ffigur 4c), a chadarnhaodd y strwythur 3D fod y mutant yn ffurfio'r bond disulfide cywir ac yn cynnal y plygu naturiol. Mae'r achos hwn yn dangos, trwy ddylunio bondiau disulfide cydffurfiol yn rhesymol, ynghyd â hidlo gel a dadansoddiad sbectrometreg màs, y gellir datrys problem plygu proteinau ailgyfunol yn effeithiol, a gellir cael proteinau swyddogaethol gyda strwythurau sefydlog a chynnyrch uchel.

Ffigur 4. Mae ailadeiladu bondiau disulfide yn gwella plygu a chynnyrch LLT1 hydawdd

 

 

 

10. Proteinau agregadwy yn hawdd

Mae puro proteinau ailgyfunol yn aml yn wynebu problem agregu, ac mae ei ffurfiant yn dilyn y mecanwaith "twf cnewyllol"-mae ychydig bach o agregau hydawdd yn ffurfio yn gyntaf ac yna'n sbarduno agregu anhydawdd ar raddfa fawr. Er mwyn mynd i'r afael â'r her hon, mae angen mabwysiadu strategaethau aml-lefel: yn y cam mynegiant, gellir cyflawni hyn trwy optimeiddio'r straen, lleihau tymheredd y diwylliant, defnyddio cyfryngau diwylliant wedi'u haddasu neu wahanol broteinau ymasiad hydoddi, a disodli systemau mynegiant (pryfed\/celloedd mamalaidd), ac ati. Yn ystod y cam puro, yn ystod y cam puro, yn ofynnol i 4 " (megis cysylltiad uniongyrchol iMac ag SEC) dylid ei fabwysiadu i gael gwared ar niwclysau agregau yn brydlon. A siarad yn gyffredinol, wrth sgrinio datrysiadau byffer, dylid ystyried ffactorau fel cyfansoddiad cydrannau, gwerth pH, ​​asiant dadleoli neu hydoddydd (Ffigur 5). Trwy optimeiddio mân canfod orthogonal (megis SEC, CD, LS, DSF a shifft tymheredd yn seiliedig ar wres fflwroleuedd, ac ati), pennwyd ansawdd y protein a'r toddiant byffer mwyaf addas.

Ffigur 5. Strategaethau ar gyfer lleddfu agregu protein

 

11. Crisialu kinase clk1 dynol (sut i gael sypiau atgynyrchiol)

Er mwyn cael clk1 kinase homogenaidd heb ffosfforyleiddiedig ar gyfer astudiaethau crisialu, mabwysiadwyd cynllun cydweithredol aml-strategaeth. Yn gyntaf, cafodd ei gyd -fynegi â λ -phosphatase yn Escherichia coli i ddileu heterogenedd autoffosfforyleiddiad. Er bod y cynnyrch wedi'i leihau, sicrhawyd dadffosfforyleiddiad llwyr. Ar ôl ei ddal gan iMac, ategwyd yr elifiant â sefydlogwyr (arginine 50mm, asid glutamig 50mm a DTT 10mm) i atal agregu, ei grynhoi, a thynnwyd ei dag trwy dreuliad TEV. Yna, gwahanwyd yr oligomer cywir gan SEC (yn cynnwys 5% glyserol a -me). Mae'r cam cyfnewid anion hanfodol terfynol yn gwahaniaethu rhwng grwpiau crisialog (heb ffosfforyleiddiedig) a grwpiau CLK1 nad ydynt yn grisialog (rhannol ffosfforyleiddiedig). Mae'n arbennig o werth nodi bod y dull lysis celloedd yn effeithio'n sylweddol ar sefydlogrwydd protein-mae'r dull pwysedd uchel a thymheredd uchel yn arwain at agregu anghildroadwy CLK1, gan dynnu sylw at bwysigrwydd triniaeth ysgafn ar gyfer paratoi kinase.

 

 

 

12. Cynhyrchu galectin -1 gyda gallu rhwymo ligand sefydlog

I baratoi galectin swyddogaethol -1 ar gyfer astudiaethau rhwymo ligand, strategaethau mynegiant a phuro pedwar cystrawen (galectin math gwyllt heb eu labelu a'i labelu wedi'i labelu {-1, heb ei labelu ac wedi'i labelu gan gystein mutant mutant mutant mutant mutant {}). Mae canfyddiadau allweddol yn dangos y gall puro cromatograffeg affinedd lactos sgrinio'n effeithiol ar gyfer proteinau sydd wedi'u plygu'n gywir, ond mae angen ei gyfuno â dialysis trylwyr (byffer HEPES) i dynnu lactos yn llwyr o'r safle rhwymo ac adfer gweithgaredd CRD. Mae galectin math gwyllt -1 yn dueddol o ocsidiad ac anactifadu, ac mae ei sefydlogrwydd yn parhau i fod yn gyfyngedig hyd yn oed ym mhresenoldeb asiantau lleihau (Ffigur 6). Fodd bynnag, mae'r mutant heb gystein yn gwella sefydlogrwydd tymor hir yn sylweddol wrth gynnal gweithgaredd crynhoad tebyg a sefydlogrwydd thermol (wedi'i wirio gan Nanodsf, ITC, ac ati) trwy ddileu dibyniaeth bond disulfide.

Ffigur 6. Mae nodweddiad hydrodynamig galectin ailgyfunol -1 yn datgelu ei ansefydlogrwydd

 

13. Tynnu endotoxin

Mae'r dull tynnu endotoxin yn seiliedig ar gromatograffeg affinedd gan gynnwys cromatograffeg â gwefr bositif (cyfnewid anion), defnyddio ligandau polycationig (fel poly-l-lysine (PLL), polyamin ansymudol (polymyxin B)), ac ychwanegu'r syrffactydd Triton X -114. Yn ystod y broses buro, rhowch sylw i baratoi'r toddiant byffer â dŵr heb LPS, a defnyddiwch golofnau neu golofnau newydd sydd ond wedi'u defnyddio mewn puriadau eraill heb LPS. Ar gyfer halogiad endotoxin, gellir deori'r system pwmp\/hylif cromatograffig dros nos yn 0. 5m NaOH neu am 4 awr yn 1. 0 m NaOH. Gwerthuswyd y swm olaf o LPS yn y sampl gan ddefnyddio Adweithydd Limulus Amebocyte Lysate (LAL), a gwiriwyd a oedd yn is na'r terfyn sy'n ofynnol ar gyfer y cais penodol.

 

14. Cymhleth protein

Mae angen optimeiddio mynegiant a phuro cyfadeiladau protein yn ôl amodau penodol. Ymhlith yr heriau mae ansefydlogrwydd neu gamddatblygu is -unedau. Gellir mynegi pob is-uned yn annibynnol a'i chydosod yn vitro, neu ei chyd-fynegi i ffurfio cyfadeiladau protein swyddogaethol. Dylai'r dyluniad adeiladu gael ei gyflwyno'n ofalus gyda labeli puro neu ganfod er mwyn osgoi ymyrryd â chynulliad, yn enwedig pan fo'r wybodaeth gymhleth yn gyfyngedig a bod angen optimeiddiadau lluosog. Yn ystod y broses buro, mae angen gwerthuso cywirdeb a sefydlogrwydd y cymhleth. Mae'r dulliau'n cynnwys SDS-PAGE (canfod is-uned), SEC (homogenedd), SEC-mal (dadansoddiad màs molar), ffotometreg màs neu sbectrometreg màs naturiol (dilysu màs). Dylid nodi y gall y cymhleth ddadleoli ar grynodiadau isel. Ar yr adeg hon, mae angen optimeiddio'r dull cromatograffig neu'r byffer (megis trwy ddrifft thermol neu amodau sgrinio DSF). At hynny, gall lleihau'r camau puro atal colli is -unedau rhyngweithio gwan a chydbwyso effeithlonrwydd puro a chywirdeb y cymhleth.

 

 

 

15. Puro cyfadeiladau antigen-gwrthgorff

Mae cyfadeiladau gwrth-antigen yn enghreifftiau nodweddiadol o gyfadeiladau protein. Gall eu cyd-grisialu ddatgelu patrymau rhwymol ac arwain optimeiddio peirianneg gwrthgyrff. Mae dulliau traddodiadol yn gofyn am buro antigenau a gwrthgyrff ar wahân ac yna eu cymysgu. Fodd bynnag, mae astudiaethau diweddar wedi dangos bod strategaethau cyd-fynegiant a chyd-buro yn fwy effeithlon. Dim ond un puro sydd ei angen i gael y cymhleth, ac ar yr un pryd, gellir sefydlogi antigenau ansefydlog trwy wrthgyrff, a gellir cyflawni mynegiant heb label hyd yn oed. Yn y sefyllfa benodol hon, mae SDS-PAGE a hidlo gel (SEC) fel arfer yn ddigonol i werthuso purdeb ac ansawdd y cymhleth.

 

Nghryno

Mae puro protein yn dechnoleg sylfaenol mewn ymchwil wyddonol. Mae cynhyrchu protein ar raddfa academaidd fel arfer yn dilyn strategaethau safonol a gall gynhyrchu proteinau purdeb uchel, hydawdd ar lefel miligram, a ddefnyddir yn helaeth mewn bioleg strwythurol, biocemeg ac ymchwil swyddogaethol. Fodd bynnag, yn aml mae angen datrysiadau addasedig i ofynion arbennig cymwysiadau i lawr yr afon (megis yr angen am ddim endotoxin mewn arbrofion anifeiliaid a dim halogiad niwclease mewn ymchwil asid niwclëig) neu nodweddion cynhenid ​​proteinau (megis agregu hawdd, sy'n cynnwys bondiau disulfide neu affinedd asid niwcleig uchel). Mae'r adolygiad hwn, mewn ymateb i'r amgylchiadau arbennig hyn, yn cynnig strategaethau wedi'u mireinio yn amrywio o ddewis systemau mynegiant, dylunio cystrawennau (optimeiddio labeli a ffiniau parth) i'r broses buro, ac yn cyflwyno rheolaeth ansawdd (megis SEC, SDS-PAGE, canfod gweithgaredd, ac ati) ar gamau allweddol. Mae angen dadansoddiad ychwanegol ar rai cymwysiadau hefyd (megis canfod endotoxin a phenderfyniad gweddillion asid niwclëig), yn debyg i'r cysyniad "sicrhau ansawdd" (QA) yn y diwydiant biofferyllol, hynny yw, i atal diffygion trwy brosesau systematig. Trwy lunio canllawiau rheoli ansawdd ac egluro safonau penodol ar gyfer adweithyddion protein a ddefnyddir mewn ymchwil wyddonol, y nod yw sefydlu normau puro protein mwy trylwyr ar gyfer labordai academaidd, gwella dibynadwyedd ac ailadroddadwyedd data arbrofol, a phontio'r bwlch rhwng ymchwil sylfaenol a safonau diwydiannol.

 

Doi: 10.1186\/s 12934-022-01778-5