Cymhwyso Ultrafiltration yn y Broses Gynhyrchu Brechlyn DTP

Cymhwysiad oUltrahidlo yn yProductionPrhoces oDTP Vaccine

 

1. Brechlyn DTP

Mae pertwsis, a elwir yn gyffredin fel y pas, yn glefyd anadlol acíwt heintus a achosir gan Bordetella pertwsis, sy'n effeithio'n bennaf ar fabanod a phlant ifanc. Mae'n cael ei drosglwyddo trwy ddefnynnau anadlol ac mae ganddo gyfnod deori o 7 i 10 diwrnod. Bydd y claf yn datblygu symptomau cronni sputum, gan gynnwys peswch. Mae difftheria yn haint llwybr anadlol acíwt a achosir gan Corynebacterium diphtheriae. Mae'r bacteria yn goresgyn y mwcosa trwynol neu'r gwddf, yn amlhau, yn cynhyrchu ecsotocsinau ac yn achosi llid lleol a necrosis meinwe. Mae tetanws, a achosir gan Clostridium tetani, yn mynd i mewn i'r corff dynol trwy glwyfau croen neu bilen mwcaidd. Mae'n ffynnu mewn amodau anaerobig ac yn cynhyrchu tocsinau, gan sbarduno cyfangiadau cyhyrau ysbeidiol.

Mae'r brechlyn DTP yn frechlyn cyfunol sy'n cynnwys cydrannau effeithiol o Bordetella pertwsis, tocsin difftheria, a thocsin tetanws wedi'u cymysgu mewn cyfrannau penodol ac wedi'u harsugno ar gynorthwyydd alwminiwm hydrocsid. Fe'i defnyddir i atal tri chlefyd: pertwsis, difftheria a thetanws.

 

2. Proses Gynhyrchu Brechlyn DTP

Mae'r brechlyn DTP fel arfer yn frechlyn anweithredol. Mae paratoi'r brechlyn DTP yn dilyn y broses o gynhyrchu brechlyn anweithredol, yn bennaf am resymau diogelwch. Ar hyn o bryd, mae'r broses gynhyrchu brechlynnau DTP yn Tsieina yn seiliedig i raddau helaeth ar dechnoleg yn y 1970au a'r 1980au. Fodd bynnag, trwy gydol y broses, roedd y camau dialysis yn cynnwys gormod o gamau hidlo confensiynol, gan effeithio'n sylweddol ar broses gynhyrchu gyffredinol y cynnyrch. Mae cynhyrchion hidlo bilen llif diriaethol â sianeli agored yn cynnig manteision o ran gwahanu cynhyrchion biolegol i lawr yr afon, megis grymoedd cneifio isel a chyfraddau adfer uchel. Maent yn arbennig o addas ar gyfer gwahanu samplau â chrynodiadau uchel, gludedd uchel, a chynnwys gronynnau uchel, gan eu gwneud yn addas ar gyfer proses gynhyrchu brechlynnau DTP.

3. Cymhwyso Technoleg Ultrafiltration Ffibr Hollow yn y Broses Buro o Hylif Antigen Cyfunol Brechlyn DTP Di-gell

(1) Deunyddiau a Dulliau

①Sampl

Hydoddiant antigen DTP di-gell wedi'i ddadhalogi a'i fireinio (y cyfeirir ato o hyn ymlaen fel hydoddiant antigen wedi'i ddadheintio).

② Prif Adweithyddion ac Offerynnau

Dðr gradd chwistrellu; sodiwm clorid (gradd fferyllol); bag dialysis; Ffibr gwag 10kDa; pwmp peristaltig.

③Ultrrafftio a Phuro Hylif Antigen DTP Di-gell

Yn gyntaf oll, canolwch yr hydoddiant antigen wedi'i ddadheintio i tua 5-plygwch y cyfaint cychwynnol gan ddefnyddio ffibr gwag 10kDa. Yn dilyn hynny, dechreuwch y broses hidlo a golchi. Nesaf, stopiwch hidlo pan fydd cyfaint yr hidlydd yn cyrraedd tua 4 i 5 gwaith y cyfaint cychwynnol. Yn olaf, rinsiwch y system gyfan ac adfer y hidlif gan ddefnyddio 1-cyfaint plyg o halwynog ffisiolegol.

④ Dialysis a Phuro Hylif Antigen DTP Di-gell

Paciwch yr hydoddiant antigen wedi'i ddadheintio yn aseptigol mewn bagiau dialysis a'i drochi mewn 0.85% hydoddiant sodiwm clorid di-haint ac yna dargludo dialysis ar 2-8 gradd .

⑤ Nodi Hylif wedi'i Buro

Adfer yn gymesur y samplau hylif ultrafiltration a dialysis-adfer i'r cyfaint cyn puro. Defnyddiwch hydoddiant antigen wedi'i ddadheintio fel dull rheoli a dadansoddi purdeb y samplau gan ddefnyddio 12% SDS-PAGE. Mesur cynnwys solet yn y datrysiadau a chyfrifo'r gyfradd adennill ar ôl centrifugio'r samplau ar 10,000 rpm am 15 munud.

Canlyniadau

①Canolbwyntio Ultrafiltration Ffibr Hollow a Golchi

Yn ystod y broses crynodiad uwch-hidlo, ceir hidlif 4,800 mL o fewn 70 munud, gan arwain at grynodiad plyg 5-. Mae'r gyfradd hidlo yn gostwng yn raddol, gyda chyfradd hidlo gyfartalog o 42 LMH (69.6 mL/munud). Yn ystod y broses olchi, ceir hidliad 5,300 mL o fewn 90 munud, gan arwain at olchi 4.4-plyg, ac mae'r gyfradd hidlo yn gostwng yn raddol, gyda chyfradd hidlo gyfartalog o 36 LMH (59.5 mL/min). Yn olaf, rinsiwch y system gyfan gyda saline ffisiolegol 1,200 mL, a chymysgwch yr hydoddiant rinsio gyda'r toddiant golchi blaenorol (1,200 mL). Ffactor crynodiad terfynol yr hylif yw 2.5-plyg. O'i gymharu â ultrafiltration, mae dialysis yn gofyn am newid y dialysate bum gwaith ac mae'n cymryd tua 6 diwrnod.

② Adnabod Hylif wedi'i Buro

Datgelodd dadansoddiad SDS-PAGE fod purdeb yr hylif antigen brechlyn DTP di-gell sy'n cael ei buro gan ddulliau uwch-hidlo a dialysis yn parhau'n gymharol ddigyfnewid, fel y dangosir yn y ffigur isod. Mae cyfradd adennill puro ultrafiltration ychydig yn is na chyfradd puro dialysis, fel y nodir yn y tabl isod.

Sampl	Cynnwys solet(%)	Cyfradd Adfer(%)
Ateb Antigen wedi'i Ddihalogi	0.872	/
Hylif wedi'i adfer gan uwch-hidlo (llai)	0.803	92.1
Hylif wedi'i adfer gan ddialysis (llai)	0.813	93.2

 

Casgliad

Mae ultrafiltration ffibr gwag yn dechnoleg gwahanu pilenni a ddefnyddir yn helaeth mewn diwydiannau fel bwyd, eplesu, fferyllol, diogelu'r amgylchedd, a pheirianneg gemegol ar gyfer gwahanu, canolbwyntio a phuro sylweddau moleciwlaidd mawr. Yn yr arbrawf hwn, defnyddiwyd technoleg ultrafiltration ffibr gwag i buro'r datrysiad antigen DTP dihalogedig di-gell. Cymharodd yr arbrofwr â dialysis traddodiadol o ran effeithlonrwydd puro a chyfradd adfer. Dangosodd y canlyniadau fod gan ultrafiltration effeithlonrwydd uwch o ran cael gwared ar gyfryngau dadwenwyno a phigmentau (cyraeddadwy o fewn 3 awr, o'i gymharu â 5-7 diwrnod ar gyfer dialysis) a bod ganddo gyfradd adferiad uwch. Mae'r rhain yn awgrymu ei bod yn ymarferol defnyddio ffibr gwag ar gyfer puro hylif antigen brechlyn DTP di-gell yn uwch-hidlo. Gall ddisodli prosesau dialysis presennol.